Organ ve Dışkı Örneklerinin Hazırlanması
• Uygun şekilde laboratuvara aktarılan organ ve dışkı örnekleri antibiyotikli PBS içerisinde 1:10 oranında (1g / 9 ml) sulandırılır (Şekil 6.1).
• Homojenizatörde veya steril havanda ezilerek homojen hale getirilir. Bu işlemhavanda yapılıyorsa ortama bir miktar steril kum ilave edilerek homojenizasyonkolaylaştırılır.
• Elde edilen homojenat tülbentli beher glass’dan süzülerek kaba partikülleriayrılır. Alttaki süzüntü santrifüj tüpüne alınır, (+4)°C’de 3000 devir/dakikahızda 10 dakika santrifüj edilir.
• Süpernatant pastör pipeti yardımıyla başka bir tüpe alınır ve konsantre antibiyotik(penisilin ve streptomisin) ilave edilir.
• Antibiyotiğin etkimesi için 1 saat oda sıcaklığında veya 1 gece (+4)°C ‘debekletildikten sonra agara ekilerek bakteri kontaminasyonu yönündenkontrol edilir. Ekim yapılan agarlar 37°C’de 24-48 saat süreyle takibe alınır.Bu süreçte inokulum (-20)°C veya daha düşük bir ısıda dondurularak muhafazaedilmelidir. Agar kontrolünde bakteri üremesi gözlenmeyen örneklerhücre kültürüne ekim için hazırdır.Şekil