Pipet Kullanımı
Pipetler sıvı haldeki maddelerin alınması veya karıştırılmasına yarayan aparatlardır. Serolojik cam pipetler, pastör pipetleri ve otomatik pipetler en çok kullanılan pipet çeşitleridir. Pipet ile ölçüm yaparken menisküs çizgisi takip edilmelidir. Cam pipet kullanılırken ağız ile pipetasyon yapılmamalıdır.
Sterilizasyon Türleri
Sterilizasyon, belirli bir ortamın veya bir materyalin tüm mikroorganizmalardan arındırılması anlamına gelir. Bu amaçla ya ortamdaki tüm mikroorganizmaların öldürülmesi veya mikroorganizmaların ortamdan ayrıştırılması uygulanabilir. Sterilizasyonu olarak kuru sıcak hava ile sterilizasyon cam malzemeler için uygulanabilir. Nemli sıcak hava ile sterilizasyon yönteminde otoklav kullanılmaktadır. Yapısı sıcaklık uygulamasından etkilenmeyen değişik sıvı materyaller ile cam ve metal malzemeler otoklavda sterilize edilebilir. Otoklav sterilizasyonunda dikkat edilmesi gereken bazı durumlar vardır.
Bunlar;
• Sterilize edilecek malzemelerin uygun şekilde paketlenmesi gerekir. Bu amaçla kağıt veya polipropilen malzemeden üretilmiş otoklav torbaları kullanılır.
• Şişeler ve şişe içerisinde sterilize edilecek sıvı malzemeler söz konusu ise; şişe kapağı tam kapatılmadan otoklava konulmalıdır. Otoklavlama işlemi bittikten sonra bu kapaklar sıkılmalıdır.• Sterilize edilecek malzemeye uygun sıcaklık ve süredeğerleri belirlenmelidir.
• Malzemeler otoklava yerleştirilmeden önce mutlakaüzerine otoklav bandı yapıştırılmalıdır.
• Organik bileşik içermeyen vasatlar (örneğin; PBS)otoklavda steril edilebilir. Ancak hücre kültürü vasatları ve diğer organik bileşikler içeren vasatlar otoklavla steril edilmemelidir.
• Kontamine ve temiz materyaller birlikte steril edilmemelidir. Sıvı materyaller ile katı malzemeler bir arada steril edilmemelidir. Elektronik donanımlı cihazlarda genellikle farklı nitelikteki malzemeler için uygulanan farklı programlar hazırlanmıştır. Yapılacak uygulama için doğru programların seçilmesine dikkat edilmelidir.
Bunlar dışında ışınlama ile sterilizasyon yapılabilir. Ayrıca gaz ile sterilizasyon işlemlerinde sıklıkla başvurulan madde etilen oksit gazıdır. Isıl işlemlerden olumsuz etkilenen hücre kültürü vasatları vb sıvı materyallerin sterilizasyonunda filtrasyon yönteminden yararlanılır. Değişik por büyüklüklerine (0,2μm; 0,45μm;0,6μm) sahip membran filtreler bulunmaktadır. Sterilizasyon uygulamalarında 0,2μm por büyüklüğüne sahip olan filtreler tercih edilir.
Filtrasyonla sterilizasyon işleminde aşağıdaki noktalara dikkat edilmelidir:
• Büyük miktardaki sıvıların sterilizasyonunda kullanılan filtrasyon sistemi öncelikle otoklavda steril edilmelidir.
• Filtre edilecek çözelti mutlaka iyice çözünmüş olmalıdır.
• Filtre edilecek sıvı içerisinde kaba partiküller varsa santrifüjleme veya ön filtrasyon (0,45μm veya 0,6μm)işlemi ile elimine edilmelidir.
• Membran filtreler tek kullanımlıktır. Tekrar kullanılmamalıdır.
• Filtre edilen materyal daha önce steril edilmiş kaplara alınmalıdır.
• Filtrasyonla yapılan sterilizasyon işleminde sadece büyüklüğü 0,2μm’den daha büyük olan partiküllerin tutulması nedeniyle virusların elimine edilemediği unutulmamalıdır.
